使用方法：
1.  常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于*次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定*篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1）  *天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)*；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1）     轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得用于臨床

分類：生化檢測(cè)
儲(chǔ)存條件：室溫,避光,6個(gè)月
用途：用于茚三酮反應(yīng)或?qū)嶒?yàn),定性蛋白質(zhì)
注意事項(xiàng)：蛋白質(zhì)與茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)紫色的還原茚三酮。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前，準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。

注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸新霉素質(zhì)量規(guī)格：≥600 I.U. /mg,USP,BRNeomycin sulfate

LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC mice with Lewis lung cancer cells DMEM+10%FBS硫酸新霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Neomycin sulfate

IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白尼羅替尼（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Nilotinib

TE-10(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HCC1428(人癌細(xì)胞)螺旋霉素質(zhì)量規(guī)格：>3900IU/MG,EP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Spiramycin

CM-M052小鼠子宮平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL螺旋霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品Spiramycin
倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A 肺癌細(xì)胞，LLC Lewis細(xì)胞 PCK細(xì)胞，大黃魚(yú)腎細(xì)胞拉羅皮蘭,MK0524質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRLaropiprant,MK-0524

人葡萄膜色素細(xì)胞;UM鹽酸頭孢噻呋質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCeftiofur hydrochloride

THPO Others Cynomolgus 食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸頭孢噻呋(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Ceftiofur hydrochloride

食管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)扎魯司特質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRzafirlukast

DMP1 Others Human 人 DMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿昔洛韋鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Acyclovir
茚三酮乙醇溶液HPAC細(xì)胞，人胰腺腺泡上皮癌 人舌癌細(xì)胞,T6細(xì)胞 雜交瘤(B類);C3110D2E11梣酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Fraxinellone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2茶黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Theaflavin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Promocell C-25010 Hepatocyte Growth Medium, 肝細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml茶黃素-3'-沒(méi)食子酸酯Theaflavin-3'-gallate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品

人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA茶黃素-3-沒(méi)食子酸酯Theaflavin-3-gallate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品

FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 柴胡皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Saikosaponin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，*將細(xì)胞稀釋至豐度不過(guò)25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。